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如何對PCR實驗室區(qū)域劃分

發(fā)布時間:2020年6月9日 來源:陜西佳美佳科教設(shè)備有限公司

PCR實驗室設(shè)計必須做好區(qū)域劃分,具體來說可以把PCR實驗室劃分為4個區(qū)域,即:試貯存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增反應混合物配制和擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)。先來簡單....

PCR實驗室設(shè)計必須做好區(qū)域劃分,具體來說可以把PCR實驗室劃分為4個區(qū)域,即:試貯存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增反應混合物配制和擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)。先來簡單介紹一下PCR實驗室,這種實驗室又叫“基因擴增實驗室”。所謂“PCR”,簡單來說就是“Polymerase Chain Reaction”的簡稱,意思是聚合酶鏈式反應。

PCR是一種分子生物學技術(shù),通過這項技術(shù)能夠放大特定的DNA片段,就好像是生物體外的特殊DNA復制一樣。通過PCR實驗室的實驗,就能夠迅速掌握待檢品中的病毒含量,其精確度高達納米級別。

PCR實驗室設(shè)計的區(qū)域劃分

1.試劑貯存和準備區(qū):此區(qū)域的作用是貯存試劑的制備、試劑的分裝、主反應混合液的制備。注意事項是實驗項目所使用的材料,如試劑與試劑原材料,標本與標本原材料等,這些都必須存放于本區(qū)內(nèi)。至于是否需要控制氣流壓力,本區(qū)倒是沒有嚴格要求。

2.標本制備區(qū):此區(qū)域的作用是臨床標本的保存、核酸(RNA與DNA)的提取與貯存、核酸加入至擴增反應管和測定RNA時DNA的合成。注意事項是為了防止鄰近區(qū)域的空氣進入本區(qū),壓力梯度對比鄰近區(qū)域要設(shè)置成正壓。進行實驗項目的操作時,工作人員要避免不必要的走動,以防止加樣操作中發(fā)生氣溶膠污染。

3.擴增反應混合物配制和擴增區(qū):此區(qū)域的作用是DNA擴增、把制備的實驗試劑做成反應混合液。注意事項是實驗擴增的污染指數(shù)比較高,壓力梯度對比鄰近區(qū)域要設(shè)置成負壓,這樣做的好處是能有效防止氣溶膠從本區(qū)泄漏。

4.擴增產(chǎn)物分析區(qū):此區(qū)域的作用是測定相關(guān)擴增片段。注意事項是實驗室設(shè)計時如果已經(jīng)預設(shè)了全自動封閉分析儀器,那么就沒有必要再劃分本區(qū)了。本區(qū)的壓力梯度對比鄰近區(qū)域要設(shè)置成負壓,這樣做的好處是能有效防止擴增產(chǎn)物擴散至其它區(qū)域。

PCR實驗室設(shè)計除了要做好區(qū)域劃分外,完備的配套設(shè)施也是必不可缺的。這么說吧,它是保證實驗工作的必要條件,但要根據(jù)實驗內(nèi)容來配備相應的設(shè)備和儀器,如超凈工作臺、生物安全柜、離心機、加樣器等。

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