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非粘附表面上球狀體、類器官和懸浮細(xì)胞的長期培養(yǎng)和高分辨率顯微鏡觀察
●優(yōu)于標(biāo)準(zhǔn)的超低附著（ULA）表面- -穩(wěn)定的生物惰性的表面， 適合長期實(shí)驗(yàn)，沒有任何細(xì)胞或生物分子粘附
●出色的顯微質(zhì)量，無任何自發(fā)熒光-100％表面鈍化，結(jié)合了ibidi Polymer Coverslip的最高光學(xué)成像特質(zhì)
應(yīng)用范圍：
●沒有任何支架的3D細(xì)胞聚集體(例如球體和類器官)的生成和長期培養(yǎng)
●懸浮體中類器官,球體,類胚體(EB)和細(xì)胞的高分辨率熒光顯微鏡觀察
●細(xì)胞間相互作用的無背景分析
●防止由于附著引起的干細(xì)胞分化
●永久未附著狀態(tài)的懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
●自組裝腫瘤球形成測(cè)定
●3D腫瘤球體模型
技術(shù)特點(diǎn)：
●μ-Dish 35 mm，高壁，具有非粘附的鈍化生物惰性表面
●即用型,無需事先表面處理或準(zhǔn)備
●200 nm 親水多元醇水凝膠——穩(wěn)定且共價(jià)結(jié)合
●無蛋白質(zhì)、抗體、酶和其他生物分子的吸附、包被或結(jié)合
●與染色和固色液兼容
●無自發(fā)熒光
●無細(xì)胞毒性,生物惰性和不可降解
●與浸油兼容
ibitreat，無包被和生物惰性--表面的比較
（ibiTreat, Uncoated, and Bioinert—A Surface Comparison）
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ibitreat
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Uncoated
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Bioinert
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優(yōu)異的細(xì)胞粘附力：
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弱細(xì)胞粘附：
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無細(xì)胞粘附：
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●貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)
●可以有ECM包被
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●貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)
●可以有ECM包被
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●懸浮細(xì)胞、細(xì)胞聚集體、球體、胚狀體(EB)、類器官的培養(yǎng)
●無法使用ECM包被
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親水性的ibiTreat即使沒有明確的蛋白質(zhì)涂層的情況下也能提供出色的細(xì)胞粘附性。但是，ECM蛋白質(zhì)包被可以在ibiTreat上完成，沒有任何限制。ibiTreat表面非常適合培養(yǎng)不需要任何包被的貼壁細(xì)胞。
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疏水性未包被的表面如果之前沒有ECM蛋白包被，則細(xì)胞粘附力較弱。ECM蛋白質(zhì)包被可以在未包被的表面上完成，沒有任何限制。未經(jīng)包被的表面非常適合需要特定包被的貼壁細(xì)胞培養(yǎng)。
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親水性生物惰性表面會(huì)阻礙任何蛋白質(zhì)的附著，從而抑制后續(xù)的細(xì)胞附著。與ibiTreat和Uncoated表面不同，不可進(jìn)行包被。Bioinert表面非常適合培養(yǎng)懸浮細(xì)胞和細(xì)胞聚集體。
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應(yīng)用示例：使用生物惰性表面的球體培養(yǎng)和FDA/PI染色
Bioinert表面非常適合球體和類器官的短期和長期3D培養(yǎng)。由于特異性和非特異性細(xì)胞固定化均被抑制，細(xì)胞被迫進(jìn)入懸浮狀態(tài)，從而形成大小球體。為了評(píng)估存活率，使用標(biāo)記活細(xì)胞的熒光素二乙酸酯(FDA)和染色死細(xì)胞的碘化丙啶(PI)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色。
有關(guān)FDA/PI染色的更多詳細(xì)信息，請(qǐng)參閱我們的應(yīng)用文件AN33_Live_Dead_staining_with_FDA_and_PI，使用FDA和PI進(jìn)行活/死染色 (PDF)。
HepG2 球體的共聚焦激光掃描部分。 HepG2 細(xì)胞球體使用基于瓊脂糖的液體覆蓋技術(shù)生成，并轉(zhuǎn)移到 μ-Dish 35 mm、高壁生物惰性培養(yǎng)皿。 FDA（綠色）表示外球體層的活細(xì)胞。 PI（紅色）標(biāo)記壞死球體中心內(nèi)的死細(xì)胞。 顯微鏡：蔡司 LSM 710，平面復(fù)消色差物鏡 10x/0.45。 比例尺為 200 μm。