具有3 x 7孔的可灌注通道μ-Slide，用于長期球體培養(yǎng)和高端顯微鏡觀察

非常適合在Bioinert表面上長期培養(yǎng)和灌注3D球體或類器官

靈活的灌注準(zhǔn)備：球體可以直接在孔中轉(zhuǎn)移或產(chǎn)生

出色的光學(xué)質(zhì)量成像室，用于高分辨率顯微鏡成像

應(yīng)用領(lǐng)域：
●三維細(xì)胞聚集體（例如球體和類器官）的培養(yǎng)和高分辨率顯微鏡
●與ibidi Pump System或任何其他帶Luer連接器的泵設(shè)備一起使用
●在長期培養(yǎng)過程中灌注球體以提供新鮮的培養(yǎng)基，并獲得球體的生長動力學(xué)
●直接在孔中產(chǎn)生球體
●球體研究以用于下游處理（例如，免疫熒光，組織學(xué)和生化測定）
●細(xì)胞單層（貼壁細(xì)胞），懸浮細(xì)胞或共培養(yǎng)的灌注
●具有上下游代謝功能的單片器官設(shè)置
●活細(xì)胞成像和3D細(xì)胞聚集的顯微鏡檢查
●活細(xì)胞和固定細(xì)胞以及細(xì)胞聚集的免疫熒光染色和高分辨率熒光顯微鏡

技術(shù)特征：
●優(yōu)化的球體/類器官培養(yǎng)和顯微鏡成像孔設(shè)計(jì)
●一張載玻片最多可分析21個(gè)樣品
●灌注可用于3D細(xì)胞聚集體培養(yǎng)過程中的最佳營養(yǎng)供應(yīng)
●開放式孔格式可輕松進(jìn)行樣品制備-用蓋玻片輕松封閉孔以適用于流體培養(yǎng)
●通道創(chuàng)建孔的簡單流體連接
●魯爾接頭使泵連接變得容易（例如，與ibidi泵系統(tǒng)連接）
●提供三種表面：
●生物惰性的表面完全鈍化，無細(xì)胞粘附
●無涂層，可最大程度地減少細(xì)胞粘附和懸浮細(xì)胞
●ibiTreat（經(jīng)組織培養(yǎng)處理）可實(shí)現(xiàn)最佳細(xì)胞粘附
●可以通過ibidi Polymer Coverslip底部使用高分辨率熒光顯微鏡觀察樣品
●與染色和固色液兼容
●與DIC蓋一起使用時(shí)兼容微分干涉對比（DIC）顯微鏡
●由完全生物相容的材料制成
 

μ-Slide球體灌注培養(yǎng)原理：

μ-Slide球體灌注是用于培養(yǎng)自由漂浮的3D聚集體的專用流動室。它由3 x 7平底孔組成，這些孔通過上方的通道連接。每個(gè)孔形成自己的壁，在此培養(yǎng)標(biāo)本。

通過通道進(jìn)行灌注時(shí)，新鮮培養(yǎng)基會持續(xù)擴(kuò)散到樣本中。這樣可確保在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中獲得最佳的營養(yǎng)和氧氣擴(kuò)散，而樣品不會受到明顯的剪切力。

該設(shè)置可確保實(shí)現(xiàn)最大的生存能力，但對球體，類器官或組織的剪切應(yīng)力最小。
 

此處顯示的是μ-Slide橢球體灌注的單孔中的計(jì)算流體動力學(xué)（CFD）模擬。 針對底部壁fluid中的標(biāo)本優(yōu)化了每個(gè)孔的流體特性。請注意，剪切力在上部孔區(qū)占主導(dǎo)地位，而生態(tài)位受到保護(hù)。

μ-Slide球體灌注載玻片是一個(gè)薄的ibidi聚合物蓋玻片底部，該底蓋具有最高的光學(xué)質(zhì)量（與玻璃相比），非常適合高分辨率顯微鏡檢查。與油浸顯微鏡和熒光成像的兼容，使μ-Slide球體灌注成為理想的球體成像室。
 

實(shí)驗(yàn)工作流程

μ-Slide球體灌注是一項(xiàng)革命性的技術(shù)，可為球體，類器官或組織創(chuàng)造理想的條件。它還允許它們同時(shí)培養(yǎng)和成像。

優(yōu)點(diǎn)：
●最佳營養(yǎng)和氣體擴(kuò)散
●減少細(xì)胞凋亡和壞死
●增大球體尺寸和壽命
●長期培養(yǎng)具有出色的生存力和增殖能力
●成熟度提高

播種預(yù)成型的球體

通過簡單的工作流程，可以使用移液器輕松地將現(xiàn)有3D細(xì)胞聚集體放入孔中。關(guān)閉孔后，用培養(yǎng)基填充通道，并使用ibidi Pump System或任何其他細(xì)胞培養(yǎng)泵開始灌注。可以使用所有常用步驟和方法（例如，懸滴，液體覆蓋，ULA平板或生物反應(yīng)器）生成球體。μ-Slide球體灌注本身不需要任何嵌入的基底，支架或支撐結(jié)構(gòu)。
 

孔內(nèi)球體的形成

或者，可以在帶有Bioinert表面的μ-Slide球狀體灌注孔內(nèi)直接生成球狀體。這種自組織過程是一種簡單且省時(shí)的方法，可在每個(gè)單孔中生成均質(zhì)的球體。
 

三維細(xì)胞聚集體可以很容易地回收用于下游應(yīng)用，例如組織學(xué)，蛋白質(zhì)譜分析和進(jìn)一步培養(yǎng)。

μ-Slide球體灌注的應(yīng)用

μ-Slide球體灌注是一種易于使用的微流生物反應(yīng)器，適用于多細(xì)胞3D聚集體的多種應(yīng)用。可選擇地，單個(gè)細(xì)胞在附著到孔底時(shí)可用作懸浮培養(yǎng)物或用作細(xì)胞單層。此外，可以將多種細(xì)胞類型組合在一個(gè)孔中，以創(chuàng)建長期的共培養(yǎng)系統(tǒng)。μ-Slide球體灌注的革命性技術(shù)提供了一種高效且可重現(xiàn)的方法，可以同時(shí)對標(biāo)本進(jìn)行生長和成像。
 

應(yīng)用實(shí)例

灌注培養(yǎng)時(shí)高度改善的球狀體生長速率
 

L929成纖維細(xì)胞在μ-Slide球狀體灌注中顯示出球狀體，Bioinert，第1至14天，接種濃度為5 x 10 5單細(xì)胞/ ml。左：無灌注，第二天換培養(yǎng)基。右：使用ibidi泵系統(tǒng)灌注，0.75毫升/分鐘。相差顯微鏡，10倍物鏡，孔直徑800 μm。

貼壁細(xì)胞熒光成像
 

接種后2小時(shí)固定在μ-Slide球形灌注液ibiTreat中的L929成纖維細(xì)胞的熒光成像。綠色：F-肌動蛋白（phalloidin）；藍(lán)色：核（DAPI）。寬視野熒光顯微鏡，10倍物鏡。