一款具有多孔氮化硅膜的μ-Slide載玻片，可用于實(shí)時(shí)觀察流動(dòng)或靜態(tài)條件下的細(xì)胞侵襲、遷移以及細(xì)胞相互作用的可視化的“ transwell ”
產(chǎn)品特點(diǎn)：
* 透過薄而多孔的薄膜獲得卓越的光學(xué)性能
* 有著廣泛的應(yīng)用，細(xì)胞可完全粘附到頂部-基底
* 對(duì)于不同細(xì)胞類型有多種孔徑大小可以選擇
應(yīng)用：
1. 流動(dòng)狀態(tài)下跨內(nèi)皮細(xì)胞遷移
2. 2D或3D凝膠內(nèi)細(xì)胞層的共培養(yǎng)和傳輸分析
3. 頂部-基底細(xì)胞極性分析
4. 頂部-基底梯度的細(xì)胞屏障模型分析
5. 細(xì)胞遷移分析（例如，用于研究腫瘤侵襲或轉(zhuǎn)移）
在μ-Slide ibiPore IV型膠原涂層3μm孔徑中人類內(nèi)皮細(xì)胞的免疫熒光染色，相位對(duì)比度、DAPI（藍(lán)色）、VE鈣粘蛋白（綠色）和F肌動(dòng)蛋白（紅色）的疊加圖像。
技術(shù)特點(diǎn):
1.SiMPore的微孔氮化硅膜
2.中間具有多孔光學(xué)膜的跨通道結(jié)構(gòu)
3.優(yōu)異的光學(xué)性能，堪比蓋玻片
4.孔徑大小0.5μm，3μm，5μm，8μm供選擇
5.中間膜0.4μm（400 nm）
6.使用工作距離>0.5mm的物鏡
7.與ibidi泵系統(tǒng)（流體剪切力系統(tǒng)）完全兼容
8.下部通道中明確的剪切力和剪切速率范圍（更多詳情請(qǐng)參見“應(yīng)用“欄中的《 AN11_Shear_stress》）
μ-Slide ibiPore SiN 工作原理
μ-Slide ibiPore SiN由插入兩個(gè)通道之間的水平多孔膜組成。上部通道是膜上方的靜態(tài)儲(chǔ)液池。下部通道是灌注通道，用于對(duì)附著在膜上的細(xì)胞施加限定的剪切應(yīng)力。上部通道和下部通道僅通過隔膜彼此連通。
多孔膜由氮化硅（SiN）制成，這種材料具有非常高的化學(xué)和機(jī)械穩(wěn)健性。400nm厚的氮化硅膜非常適合成像和顯微鏡觀察，沒有任何自發(fā)熒光或透明度問題（如玻璃）。SiN材料可以直接用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，也可以選擇用ECM蛋白包被。
應(yīng)用建議：孔徑 & 孔密度
什么是孔密度
孔密度是指膜的空隙體積分?jǐn)?shù)。是孔隙的體積除以膜的總體積。下面的圖形為采用相同的放大倍數(shù)。
不同應(yīng)用的建議孔徑：
Intended Use 經(jīng)證實(shí)的應(yīng)用：
這些應(yīng)用已由ibidi研發(fā)團(tuán)隊(duì)或者我們的用戶進(jìn)行過試驗(yàn)。
Endothelial Barrier Assays 內(nèi)皮屏障分析
在膜的一側(cè)培養(yǎng)細(xì)胞單層。細(xì)胞可以在靜止或者流動(dòng)剪切力條件下培養(yǎng)。
Co-Culture and Cell Barrier Assays 共培養(yǎng)和細(xì)胞屏障分析
在膜的兩側(cè)分別培養(yǎng)單層細(xì)胞。通過這種方法可以進(jìn)行信號(hào)傳遞、共培養(yǎng)以及遷移實(shí)驗(yàn)（例如，分析藥物通過上皮或內(nèi)皮屏障的傳遞）。
Apical-Basal Cell Polarity Assays 頂端-基底端細(xì)胞極性分析
3D凝膠基質(zhì)中的化學(xué)因子可以導(dǎo)向在膜另一側(cè)培養(yǎng)的單層細(xì)胞的極性發(fā)生。
Potential Use 潛在應(yīng)用：
Trans-Membrane Migration in 2D/2D 跨膜遷移
在膜的一側(cè)培養(yǎng)單層細(xì)胞?？梢杂^察懸浮的白細(xì)胞在流動(dòng)狀態(tài)下的滾動(dòng)、粘附以及侵襲情況。
Cell Transport in a 3D Gel Matrix 細(xì)胞在3D凝膠基質(zhì)中的傳遞
3D凝膠基質(zhì)中的細(xì)胞遷移：在流動(dòng)狀態(tài)下，觀察白細(xì)胞的滾動(dòng)、粘附以及向3D凝膠基質(zhì)中腫瘤細(xì)胞方向的遷移情況。
Application Examples 應(yīng)用實(shí)例
MDCK和NIH-3T3細(xì)胞的相差顯微鏡觀察
Madin-Darby犬腎（MDCK，左）和NIH-3T3（右）細(xì)胞在μ-Slide ibiPore SiN，孔徑0.5μm的玻片中，無蛋白質(zhì)包被。接種后，將細(xì)胞在靜態(tài)條件下在培養(yǎng)箱中保持20小時(shí)。相差顯微鏡，4倍物鏡。請(qǐng)注意，這張圖像中的中心多孔區(qū)域看起來更暗，因?yàn)?.5μm的孔隙無法用低分辨率物鏡分辨。
流動(dòng)條件下HUVECS的相差顯微觀察
人臍靜脈上皮細(xì)胞（HUVEC）在μ-Slide ibiPore SiN中，孔徑3μm的玻片中，有纖連蛋白包被。將細(xì)胞接種并在具有ibidi泵系統(tǒng)/流體剪切力系統(tǒng)的流動(dòng)條件（10達(dá)因/cm2）下在培養(yǎng)箱中保持12小時(shí)。固定后的相位對(duì)比顯微鏡，10倍物鏡。
流動(dòng)下HUVECs F肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的熒光顯微鏡觀察
人臍靜脈上皮細(xì)胞（HUVEC）在μ-Slide ibiPore SiN，孔徑5μm玻片中的免疫熒光染色，有纖連蛋白包被。將細(xì)胞接種并在具有ibidi泵系統(tǒng)/流體剪切力系統(tǒng)的流動(dòng)條件（10達(dá)因/cm2）下在培養(yǎng)箱中保持12小時(shí)。綠色：肌動(dòng)蛋白（鬼筆肽），藍(lán)色：細(xì)胞核（DAPI）。熒光顯微鏡，20倍物鏡。
選擇指南：ibidi 跨膜分析實(shí)驗(yàn)解決方案
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μ-Slide I Luer 3D
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μ-Slide ibiPore SiN
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玻片原理
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界面原理
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基于凝膠的
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基于膜的
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細(xì)胞基質(zhì)
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軟水凝膠(如膠原蛋白或基質(zhì)凝膠)
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不同孔徑的硬質(zhì)膜
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顯微成像
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受到凝膠光學(xué)的限制
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沒有限制
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流體應(yīng)用
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通道中明確的剪切力
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下部通道中明確的剪切力
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應(yīng)用
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屏障功能
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是
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遷移
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是
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是
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細(xì)胞極化
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是
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是
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剪應(yīng)力
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是
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是
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參考文獻(xiàn):
Salvermoser, Melanie, et al. "Myosin 1f is specifically required for neutrophil migration in 3D environments during acute inflammation." Blood, The Journal of the American Society of Hematology 131.17 (2018): 1887-1898. 10.1182/blood-2017-10-811851
Rohwedder, Ina, et al. "Src family kinase-mediated vesicle trafficking is critical for neutrophil basement membrane penetration." Haematologica (2019). 10.3324/haematol.2019.225722
Non-Recommended Applications 不建議的應(yīng)用
因技術(shù)原因，本產(chǎn)品不適用于以下應(yīng)用，應(yīng)避免使用.
本產(chǎn)品不適用于：
1.上通道灌注
2.兩個(gè)通道的灌注
3.跨膜流動(dòng)
4.篩選應(yīng)用