傷口愈合實驗/劃痕實驗怎么制造筆直的劃痕?
傳統(tǒng)傷口愈合實驗的方法是:
用槍頭劃過單層細胞,制造出劃痕再觀察細胞“愈合”的情況。
實驗方法缺陷:
1.人工制造的“劃痕”很難保證一致性,實驗重復(fù)性差;
2.手動劃痕可能會劃傷培養(yǎng)器皿表面的包被,進而影響實驗結(jié)果。
ibidi 實驗方法:
傷口愈合插件 (culture-insert)
優(yōu)勢:
*設(shè)計精巧,操作簡單;
*生物相容性硅膠制成的插件,靜電吸附,一般平滑的表面都能吸附;
*劃痕一致性好,產(chǎn)生確定的500μm “劃痕”區(qū)域;
*實驗可重復(fù)性高;
*細胞用量少,節(jié)省培養(yǎng)基;
*細胞無損傷;
*標(biāo)準(zhǔn)化的數(shù)據(jù)分析方法恰恰彌補了傳統(tǒng)實驗方法的不足。
應(yīng)用:
1.傷口愈合實驗
2.細胞遷移實驗
3.2D侵襲實驗
4.細胞共培養(yǎng)
操作步驟:
其他應(yīng)用:
1. 二維侵襲實驗:
2. 共培養(yǎng):
特點:
1. 在一定程度上模擬了體內(nèi)細胞遷移的過程。
2. 適合研究細胞與胞外基質(zhì)(ECM),細胞與細胞之間相互作用引起的細胞遷移。
3. 與包括活細胞成像在內(nèi)的顯微鏡系統(tǒng)兼容,可用于分析細胞間的相互作用。
4. 研究細胞遷移的體外實驗中簡單的方法。
ibidi 培養(yǎng)插件與傳統(tǒng)劃痕實驗比較
ibidi 培養(yǎng)插件提供重復(fù)性更好的實驗結(jié)果:
左圖是傷口愈合插件做出的實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計;右圖是槍頭劃痕做出的實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計